Relevancia clínica de la prueba de Coomb (prueba de antiglobulina)

La prueba de Coombs es una técnica simple e ingeniosa. La prueba de Coombs se describió por primera vez en 1908 por Moreschi y luego fue redescubierta por RR Coombs y colaboradores en 1945 para demostrar anticuerpos no aglutinantes contra los antígenos de los glóbulos rojos.

(Los anticuerpos se denominan anticuerpos "no aglutinantes" porque los anticuerpos no podrían causar aglutinación, a pesar de su unión con los antígenos en los eritrocitos. Los anticuerpos a veces también se conocen como "anticuerpos incompletos" ya que los anticuerpos no causan aglutinación. Pero no hay ninguna incompletud en la estructura de la molécula de anticuerpo.)

Los anticuerpos no aglutinantes, de hecho, se unen a los antígenos en la superficie de los glóbulos rojos. Pero la aglutinación esperada de glóbulos rojos no se produce. Cuando se agrega otro anticuerpo (llamado anti-anticuerpo o antiglobulina) contra el anticuerpo unido a RBC, se produce aglutinación. Los anticuerpos contra anticuerpos se unen a las regiones Fc de los anticuerpos unidos a RBC y forman una red, que conduce a la aglutinación. La prueba se llama prueba de antiglobulina o prueba de Coombs.

Hay dos tipos de pruebas de anti-globulina:

1. Prueba directa de anti-globulina (DAT)

2. Prueba indirecta anti-globulina (IAT)

1. La prueba directa de anti-globulina (DAT, por sus siglas en inglés) se usa para detectar anticuerpos, que están unidos a los eritrocitos in vivo.

Los glóbulos rojos lavados de un paciente se mezclan con anti-globulina.

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Las anti-globulinas se unen a los anticuerpos no aglutinantes en la superficie de los eritrocitos y causan una aglutinación visible. El resultado de la prueba es DAT positivo (Fig. 16.6).

Por lo tanto, un DAT positivo sugiere que los glóbulos rojos del paciente están recubiertos con anticuerpos no aglutinantes y se dice que el paciente es DAT positivo.

yo. La DAT positiva ocurre con los RBC del recién nacido con enfermedad hemolítica del recién nacido (los RBC de la HDN están recubiertos con anticuerpos anti-Rh).

ii. Actualmente, DAT se utiliza para detectar anticuerpos IgG y C3b unidos a la superficie de los glóbulos rojos. En pacientes que presentan hemólisis, la prueba DAT es útil para determinar si la hemólisis es de etiología inmunológica o no.

Fig. 16.6: Prueba de aglutinación directa de Coomb (DAT).

DAT se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos no aglutinantes unidos a la superficie de los glóbulos rojos. A. Los RBC lavados del individuo se mezclan con el reactivo anti-globulina. Las anti-globulinas se unen a las regiones Fc de los anticuerpos unidos a RBC y causan aglutinación visible, y se dice que el individuo es DAT positivo. B. Si los RBC no están recubiertos con anticuerpos, no habrá aglutinación y se dice que el individuo es DAT negativo. El DAT se usa también para detectar la presencia de glóbulos rojos recubiertos con anticuerpos anti-Rh de recién nacidos sospechosos de padecer una enfermedad hemolítica del recién nacido

yo. Causas no inmunes de hemólisis [como coagulación intravascular diseminada, deficiencias de enzimas de glóbulos rojos [como deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (deficiencia de G6PD), defectos de la membrana de los glóbulos rojos (como esferocitosis hereditaria, HPN) y hemoglobinopatías (como anemia de células falciformes, talasemia)] son ​​DAT negativos.

ii. Las causas inmunes de hemólisis (como anemia hemolítica autoinmune, hemólisis inducida por fármacos, reacciones de transfusión hemolítica) son DAT positivas.

iii. Se observa un DAT positivo debido a C3 solo en pacientes con autoanticuerpos fríos, hemoglobinurea paroxística y en algunos casos de anemias hemolíticas inducidas por fármacos.

2. La prueba de aglutinación indirecta (IAT) se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos no unidos contra los eritrocitos en el suero de un paciente.

yo. IAT para detectar anticuerpos anti-Rh en el suero de la madre:

El suero de la madre se incuba con un grupo sanguíneo Rh positivo O RBC. Si los anticuerpos anti-Rh están presentes en el suero de la madre, los anticuerpos se unirán a los glóbulos rojos. Los glóbulos rojos se lavan.

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Luego se agrega el reactivo anti-globulina.

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Si los anticuerpos anti-Rh están presentes en el suero de la madre, los glóbulos rojos se aglutinarán y la prueba es positiva para IAT.

ii. IAT para detectar anticuerpos en el suero de un receptor contra los glóbulos rojos del donante durante la transfusión de sangre:

La prueba IAT se emplea ampliamente (antes de la transfusión de sangre) en la comparación cruzada de los glóbulos rojos del donante con el suero del receptor para detectar la presencia de anticuerpos en el receptor, que puede reaccionar con los glóbulos rojos del donante.

Lavar los glóbulos rojos del donante.

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Agregue el suero del receptor a los glóbulos rojos e incube a 37 ° C durante 30 minutos.

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Lavar los glóbulos rojos.

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Añadir el reactivo anti-globulina.

El desarrollo de la aglutinación indica que el suero del receptor tiene anticuerpos contra los glóbulos rojos del donante y la prueba se informa como positiva para anticuerpos. Un resultado positivo de la IAT indica que la sangre del donante propuesto no debe transferirse al receptor en cuestión.

Las preparaciones actuales del reactivo de prueba anti-globulina (también llamado reactivo de Coombs) contienen un "cóctel" de anticuerpos monoclonales dirigidos contra IgG humana y C3b (la unión de anticuerpos no aglutinantes a los eritrocitos activan el sistema del complemento que resulta en la deposición de fragmentos de C3b sobre el Los glóbulos rojos y, por lo tanto, aparte de los anticuerpos, los glóbulos rojos también están recubiertos con fragmentos C3b).